Isolement de champignons rhizosphériques associés à Globularia alypum L. et dépistage de l’activité antimicrobienne de leurs métabolites secondaires

Abstract

الهدف من هذه الدراسة عزل وتقييم الإمكانيات المضادة للبكتيريا للفطريات الجذرية المرتبطة بنبات العينون Globularia alypum L ) ) التي تنتمي الى عائلة ) Plantaginaceae (، التي تم جمعها في منطقة الرابطة الحمادية برج بوعريريج )الجزائر(. من بين 73 عزلة فطرية تم الحصول عليها، تم اختيار 12 منها للفحص الأولي بطريقة أسطوانة الأجار. أظهرت الاختبارات ضد Escherichia coli و Staphylococcus aureus و Candida albicans نشاطًا مثبطًا في 9 عزلات ) 13.77 ٪(، مع مناطق تثبيط تتراوح من 22 إلى 13.2 ملم. سمح التحديد المورفولوجي بتعريف العديد من الأنواع، على انها Aspergillus (sp.1, sp.2), Penicillium ( sp.1,sp.2, sp.3) , و . Acremonium sp خضعت العزلات الأكثر نشاطًا ) CH1 ، CH4 ، CH5 ، CH11 ، CH15 و CH21 ( لعملية تخمير في وسط سائل، تلتها عملية استخلاص باستخدام المذيب العضوي أسيتات الإيثيل. أظهرت اختبارات النشاط المضاد للميكروبات بطريقة الانتشار على الأجار تثبيطًا ملحوظًا ضد مجموعة واسعة من الكائنات الحية الدقيقة، بما في ذلك البكتيريا موجبة الغرام ( Staphylococcus aureus ، Streptococcus pyogenes, Bacillus cereus, (Enterococcus faecalis, Listeria monocytogenes, Micrococcus luteus ( والبكتيريا سالبة الغرام ) Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, Klebsiella pneumoniae ( و الخميرة (Candida albicans ) . تراوحت أقطار مناطق التثبيط بين 21.12 و 17 ملم ، حيث سُجّلت أكبر المناطق لدى Penicillium sp.2 11 ملم( ضد ( Bacillus cereus ، و Penicillium sp.1 12 ملم( ضد ( Staphylococcus aureus ، Bacillus cereus و Micrococcus luteus ، و 17 ملم ضد Streptococcus pyogenes. . وقد تميزت العزلات Penicillium sp.1 و sp.3 بنشاطها المضاد للبكتيريا العالي. أما تحديد التركيز المثبط الأدنى ) MIC ( فقد أظهر قيماً تراوحت بين 9.3.9 و 2.291 ملغم/مل، مما يؤكد إمكانياتها الواعدة في انتاج المستقلبات الثانوية المضادة للبكتيريا. الكلمات المفتاحية: Globularia alypum L ، الفطريات الجذرية، نشاط مضاد للبكتيريا، Aspergillus sp. ، Cette étude a permis d'isoler et d'évaluer le potentiel antimicrobien de champignons rhizosphériques associés à Globularia alypum L. de la famille (Plantaginaceae), collectés dans la région de Rabta El Hamadia Bordj Bou Arreridj (Algérie). Parmi les 37 isolats fongiques obtenus, 21 ont été sélectionnés pour un criblage préliminaire par la méthode des cylindres d'agar. Les tests réalisés contre Escherichia coli, Staphylococcus aureus et Candida albicans ont révélé une activité inhibitrice chez 9 isolats (24,33%), avec des zones d'inhibition variant entre 11 et 24,5 mm. L'identification morphologique a permis de caractériser trois genres fongiques, incluant deux isolats d’Aspergillus sp.1 et sp.2, trois Penicillium sp.1, sp.2 et sp.3 et un isolat d’Acremonium sp. Les isolats les plus actifs (CH1, CH4, CH5, CH11, CH15 et CH21) ont fait l'objet d'une fermentation en milieu liquide suivie d'une extraction à l'acétate d'éthyle. Les tests d’activité antimicrobienne par diffusion sur gélose ont révélé une inhibition significative vis-à-vis d’un large éventail de micro-organismes, incluant des bactéries à Gram-positifs (Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis, Listeria monocytogenes, Micrococcus luteus), et des bactéries à Gram-négatifs (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, Klebsiela pneumoniae), et la levure (Candida albicans). Les diamètres moyens des zones d’inhibition variaient entre 12,25 mm et 23 mm, les plus importantes étant observées avec Penicillium sp.2 (22 mm) contre Bacillus cereus et Penicillium sp.1 (21 mm) contre Staphylococcus aureus, Bacillus cereus et Micrococcus luteus et 23mm contre Streptococcus pyogenes. Les souches Penicillium sp.1 et sp.3 se sont particulièrement distinguées par leurs fortes activités antimicrobiennes. La détermination de leur concentration minimale inhibitrice (CMI) a révélé des valeurs comprises entre 0,469 et 8,192 mg/mL, ce qui confirme leur potentiel prometteur dans la production de métabolites secondaires antibactériens. Les mots clés : Globularia alypum L, champignons rhizosphériques, activité antibactérienne, Aspergillus sp., Penicillium sp., Acremonium sp. This study allowed the isolation and evaluation of the antimicrobial potential of rhizospheric fungi associated with Globularia alypum L. (Plantaginaceae), collected in the region of Rabta El Hamadia Bordj Bou Arreridj (Algeria). Among the 37 fungal isolates obtained, 21 were selected for a preliminary screening by the agar cylinder method. The tests carried out against Escherichia coli, Staphylococcus aureus, and Candida albicans revealed an inhibitory activity in 9 isolates (24.33%), with inhibition zones varying between 11- and 24.5-mm. Morphological identification allowed the characterization of three fungal genera, including two isolates of Aspergillus (sp.1 and sp.2), three of Penicillium (sp.1, sp.2, and sp.3), and one isolate of Acremonium sp. The most active isolates (CH1, CH4, CH5, CH11, CH15, and CH21) underwent liquid-state fermentation followed by extraction with ethyl acetate. Antimicrobial activity tests using agar diffusion revealed significant inhibition against a wide range of microorganisms, including Gram-positive bacteria (Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis, Listeria monocytogenes, Micrococcus luteus) and Gram-negative bacteria (Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, Klebsiella pneumoniae), and the yeast (Candida albicans). The average inhibition zone diameters ranged from 12.25 mm to 23 mm, with the largest zones observed for Penicillium sp.2 (22 mm) against Bacillus cereus, and Penicillium sp.1 (21 mm) against Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, and Micrococcus luteus and 23mm against Streptococcus pyogenes. Penicillium sp.1 and sp.3 stood out in particular due to their strong antimicrobial activity. The determination of their minimum inhibitory concentration (MIC) revealed values ranging from 0.469 to 8.192 mg/mL, which confirms their promising potential in the production of antibacterial secondary metabolites. Keywords: Globularia alypum L, rhizospheric fungi, antibacterial activity, Aspergillus sp., Penicillium sp., Acremonium sp.